Faktory ovlivňující účinek odstranění virů
Faktory ovlivňující účinek odstranění virů
Filtrace na odstranění virů může významně odstranit viry v roztocích a její účinek odstranění souvisí s tím, kde probíhá filtrace na odstranění virů, koncentrací bílkovin v krmné kapalině, tlakem filtrace, dobou skladování a kryokonzervací atd.
1. Kde probíhá filtrace pro odstranění virů
Filtrace k odstranění virů se může provádět kdekoli v následné purifikaci, ale obvykle k ní dochází po inaktivaci viru s nízkým pH, středních krocích chromatografie nebo závěrečných krocích chromatografie. Celkově v průběhu následného procesu jsou skutečné požadavky na filtraci vysoce závislé na tom, kde v procesu se nachází krok filtrace viru, protože koncentrace proteinu, čistota a objemy procesu se mohou lišit.
2. Koncentrace bílkovin v krmné kapalině
Koncentrace proteinu ve vzorku ovlivní tok filtrace pro odstranění viru prostřednictvím interakce mezi napájecím roztokem a membránovým vakem. Vyšší koncentrace proteinu sníží rychlost filtračního procesu odstraňování virů. Souvisí to i s vlastnostmi samotného proteinu a samotné membrány. Obvykle se koncentrace produktu snižuje během kontinuálního ředění produktu, aby se zvýšila kapacita a průtoková rychlost filtrační membrány pro odstranění virů.
3. Filtrační tlak
Proces filtrace odstraňování virů obecně potřebuje zajistit nepřetržitou filtraci. Protože přerušení tlaku může vést k pronikání viru. Princip spočívá v tom, že konvekční účinek přiváděné kapaliny protékající filtrem způsobuje zachycení virových částic na povrchu membrány nebo zachycení v menší velikosti pórů v důsledku vyloučení velikosti molekul. Při poklesu tlaku klesá průtok a konvekční efekt. Virus unikne a uvolní se z malých pórů a difunduje do velkých pórů s vysokou pravděpodobností proniknutí.
4. Doba skladování a kryokonzervace
Některé proteiny tvoří agregáty během procesu skladování, zejména během kryokonzervace. Tyto agregáty mohou mít dopad na filtraci odstraňování virů. Proto je třeba vyhodnotit, zda je ve výrobním procesu dlouhá doba skladování nebo kdy je nutná kryokonzervace.
